中草药　ChineseTraditionalandHerbalDrugs　第41卷第2期2010年2月

差异值得深入研究,连翘叶和花的药用价值也需要

进一步验证。

本实验采用PDA检测器对最佳检测波长进行选择,经HPLC2PDA在200～400nm下进行全波长扫描,在235nm处出峰最多且整体信号明显,故选择235nm为检测波长。

本实验比较了不同提取溶剂(甲醇、75%甲醇、50%甲醇、30%甲醇)的水浴回流和超声提取的提取效果,同时还考察了不同提取时间的提取效果。结果表明,以75%甲醇为提取溶剂,当超声提取45min时,各色谱峰响应值不再增加,且方法稳定,重现性好。

参考文献:

301

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,2,1,1,1,游　海1,朱　笃1,23

(11,江西南昌　330022;

,江西宜春　336000)

摘　要:　优化杜仲细胞悬浮培养及其产绿原酸的条件。方法　研究基本培养基种类、激素质量浓度、碳源种

类及质量浓度、pH值、接种量和摇床转速等因素对杜仲细胞生长和绿原酸产量的影响,建立了高产绿原酸的悬浮细胞培养体系。结果　B5培养基+015mg/LNAA+016mg/L62BA、蔗糖30g/L、初始pH510～515、接种量20g FW/L以及摇床转速110r/min为杜仲细胞悬浮培养的适合条件。结论　优化后的培养条件为杜仲细胞大规模悬浮培养生产天然活性成分奠定了基础。关键词:杜仲;细胞悬浮培养;绿原酸中图分类号:R28211　　　文献标识码:A　　　文章编号:02532670(2010)02030104

　　杜仲EucommiaulmoidesOlive为杜仲科杜仲属多年生落叶乔木,其干燥树皮为我国特有名贵中药,具有补肾健腰、强筋壮骨、提高机体缺氧耐力、改善提高机体免疫功能、降低血脂、平衡调节血压等功效。其药用成分包括木脂素类、环烯醚萜类、苯丙素类和黄酮类等。其中属于苯丙素类物质的绿原酸具有广泛的抗菌、抗病毒、抗诱变、抗肿瘤作用[1]。绿原酸具有较强药理活性,对消化系统、血循环系统和生殖系统均有作用[2],还可能作为抗HIV的先导化合物,具有抗逆转录酶的活性[3]。但是杜仲作为第三纪孑遗的古老树种,其野生资源正在日益稀竭,同时杜仲栽培周期长,商品药材的有效药用成分量极低,产量质量都不稳定。运用细胞工程生产有用次生代谢物质是目前全世界生物技术研究的三大潮流

3　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　收稿日期:2009204208

之一,因此采用生物技术提高其活性成分的量势在

必行。目前,有关杜仲的组织培养、快繁及培养条件对愈伤组织次生代谢产物合成影响的研究国内外已有较多研究,但有关杜仲细胞悬浮培养研究仅有少量报道[4,5]。本实验通过对杜仲细胞悬浮培养及其产绿原酸条件优化,为通过杜仲细胞大规模生产次级代谢产物奠定基础。1　材料与方法111　材料:杜仲种子2005年11月采于庐山,由南昌大学生命科学学院黄兆祥教授鉴定。

112　愈伤组织的诱导:杜仲愈伤组织系由杜仲种子

萌发的无菌苗真叶诱导,诱导的培养基为含110mg/L2,42D+110mg/LNAA(萘乙酸)+110mg/L62BA(62苄氨基嘌呤)的MS培养基[6]。置于

基金项目:教育部重点科技项目资助(地方204078)

),男,在读博士研究生,研究方向为发酵工程。E2mail:yanriming@yahoo1com1cn作者简介:颜日明(1979—

3通讯作者　朱　笃　Tel:(0795)3200616　E2mail:zhudu12@1631com