※分析检测食品科学

2010, Vol. 31, No. 14275

杜仲绿原酸的分离纯化及结构鉴定

卢 琪，段家彩，高 丽，陈若雯，傅虹飞，潘思轶*

(华中农业大学食品科学技术学院，湖北 武汉 430070)

摘 要：筛选大孔树脂纯化澄清后的杜仲绿原酸粗提液，并对纯化后的绿原酸进行初步的结构鉴定。采用壳聚糖、活性炭澄清绿原酸的粗提液，选取7种不同类型的大孔树脂对杜仲绿原酸进行静态吸附解吸实验比较。结果表明，NKA-2型大孔树脂对绿原酸有较好的选择性，其吸附率和解吸率分别为99.67%和62.8%。盐酸调整洗脱液的pH值为3，洗脱液的体积分数为30%时，洗脱效果最好。澄清后的绿原酸粗提液经乙酸乙酯萃取除去黄酮，再用NKA-2型树脂进行梯度洗脱，可得到纯度为76.3%的绿原酸。HPLC-MS分析表明，绿原酸是咖啡酸和奎尼酸缩合的缩酚酸。

关键词：绿原酸；大孔树脂；纯化；鉴定

Purification and Structural Identification of Chlorogenic Acid from Eucommia ulmoides Leaves

LU Qi，DUAN Jia-cai，GAO Li，CHEN Ruo-wen，FU Hong-fei，PAN Si-yi*

(College of Food Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China)

Abstract ：Eucommia ulmoides leaves were extracted with 60% aqueous ethanol under the assistance of ultrasound. The crudeextract was then condensed on a rotation evaporator, added with chitosan acetic acid solution and stirred, allowed to stand at 60℃ for 60 min for precipitate sedimentation, and filtrated. The filtrate was decolorized with activated carbon prior to 5-time ethylacetate extraction to remove flavonoids. The lower phase was collected and a chlorpgenic acid extract was obtained. Seven typesof moroporous resins were used to purify the chlorpgenic acid extract, and NKA-2 was the selected resin because it exhibitedgood selectivity to chlorpgenic acid and the static adsorption and desorption ratios were 99.67% and 62.8%. The use of 30%acidified ethanol (pH 3) provided an optimum elution. After NKA-2 purification in the gradient elution mode, a chlorpgenic acidproduct with 76.3% purity was obtained. Chlorpgenic acid was confirmed by HPLC-MS analysis to be a condensation productof caffeic acid and quinic acid.

Key words：chlorogenic acid；macroporous resin；purification；identification

中图分类号：Q946.81；R931.71 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2010)14-0275-05

杜仲是我国的传统经济作物，其药用价值一直备受关注。其活性成分绿原酸在杜仲叶中含量为2%～5%，具有利胆、降压、抗菌、消炎及升高白细胞等药理作用[1]。近年来研究表明杜仲叶中的主要化学成分和杜仲皮基本一致，且杜仲叶中绿原酸含量更为丰富，因此从原材料丰富且价廉的杜仲叶中提取绿原酸成为近年来的研究热点[2-4]。2%～98%纯度的绿原酸被广泛应用于保健产品、片剂、胶囊药品和中药注射药品等。

通常人们用溶剂提取后再用聚酰胺或凝胶色谱柱分离绿原酸[5]，传统的纯化方法会消耗大量的试剂和体力。近来，高效液相制备柱和分子印迹已用于制备高纯度的绿原酸，纯化方法昂贵且受到仪器的限制[6-7]。因

此采用简单易行的方法大量制备高纯度的绿原酸具有重要意义。大孔树脂可通过静电、氢键相互作用、络合、分子筛作用选择性的吸附水溶性或非水溶性物质，大孔树脂分为非极性(聚苯乙烯)、中极性(酯)和极性(酰胺，胺基，酰胺基聚苯乙烯)，是具有高吸附容量的大孔聚合物[8]，能够有效地用于中草药活性成分的吸附除杂。

杜仲叶提取物中除含绿原酸外，还含有鞣质、蛋白质和多糖等物质，为了得到纯度较高的绿原酸，必须对提取液进行多步分离纯化[9]。本研究采用絮凝澄清、萃取、大孔树脂梯度洗脱的方法分离纯化杜仲绿原酸，并通过HPLC-MS对绿原酸的结构进行初步鉴定，以期为大量制备杜仲绿原酸提供新的方法，为绿

收稿日期：2009-10-14

作者简介：卢琪(1986—)，女，硕士研究生，研究方向为食品科学与工程。E-mail：chitty1986@yahoo.com.cn

*通信作者：潘思轶(1964—)，男，教授，博士，研究方向为农产品贮藏与加工。E-mail：pansiyi@mail.hzau.edu.cn