酵母菌培养
酵母菌的扩培
3 菌种和培养基
3.1 菌种：啤酒酵母
3.2 培养基
3.2.1 酵母斜面培养基
10°麦芽汁固体斜面，pH5.0
3.2.2 酵母摇瓶种子培养基
10°麦芽汁，pH5.0或葡萄糖10%，玉米浆1%，尿素O.2%，pH5.0。
3.2.3 酵母分批发酵培养基
玉米粉经液化、糖化，折合葡萄糖浓度为10%，玉米浆1%，硫酸铵0.4%，pH5.5。
3.2.4酵母分批补料发酵培养基(学生讨论提出)
4 实验仪器、设备
（1）5升发酵罐；
（2）摇瓶机或手摇；
（3）超净工作台；
（4）离心机
（5）显微镜
（6）分光光度计
（7）三角瓶。
5 实验过程
5.1 分批培养
5.1.1 总流程
斜面培养 斜面培养基配制与灭菌，接种，培养
↓ 所需仪器物品：灭菌锅，试管，棉塞，培养基原料，培养箱
摇瓶种子 300毫升种子液，500ml三角瓶三只。装液100ml，培养基，培养摇瓶，纱布。
↓
上罐培养 (双酶制糖)糖化液稀释至l0%浓度，添加辅料，灭菌，接种。
↓
菌体分离 离心机或板框过滤器
5.1.2 斜面种子制备
自保藏斜面中挑取一环酵母菌体接入新鲜的斜面试管中，于28℃培养箱中培养24h。
5.1.3 摇瓶种子的制备
将上述培养好的斜面种子接入500ml三角瓶装的灭过菌的100ml摇瓶种子培养基中，在28℃，200rpm震荡培养15-20h。
5.1.4 发酵罐培养
5升发酵罐装入2升发酵培养基，121℃灭菌20min，冷却至30℃，将培养好的摇瓶种子接入发酵罐（接种量2~3%）进行发酵。发酵条件为：温度28℃，
5.1.5 过程监控
0小时：取样测定总糖和还原糖；
4~24小时：每隔4小时取样镜检、、菌体浓度；
