ELISA检测胰岛素

ELISA法检测人胰岛素

1,将所有的试剂和样本平衡至室温;

2,在微孔板中加入25ul校准品、标本,均为2复孔;

3,每孔加入酶结合液100ul;

4,室温避光震荡孵育1h;

5,手工洗板:每孔加200ul洗液,将微孔板内液体甩出,倒扣于吸水纸上使孔内液体完全流出,如此反复5次;

6,每孔加入200ul的TMB;

7,室温避光孵育15min;

8,在微孔板中每孔加入50ul终止液,震荡5S确保溶液充分混合;

9,读取450nm处吸光度,根据标准品绘制标准曲线,代入曲线计算胰岛素浓度,取平均浓度;

10,GSI = HG:胰岛素的量[IV]/ LG:胰岛素的量[IV]

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